印染废水是目前主要的水体污染源之一。它含大量的有机污染物,排入水体将消耗溶解氧,破坏水生态平衡,危及鱼类和其它水生生物的生存。沉于水底的有机物,会因厌氧分解而产生硫化氢等有害气体,恶化环境。染料废水的高色度会影响水体中动植物的生长繁殖,妨碍水体的自然净化,破坏水体的生态系统。由此可见,染料脱色是印染废水治理的关键环节[1]。由于微生物繁殖速度快,适应性强,利用其进行废水处理,成本低廉,许多学者[2～4]致力于分离选育对染料有较高的降解活性的菌株。吴赞敏等人[4]于2005年分离得到一种可以降解兰纳素藏青B-01的细菌x3,其脱色率可以达到65%。在印染废水处理中,活性染料是较难脱色的染料之一,笔者主要针对活性蓝染料有脱色能力的菌株,进行分离筛选,并对其降解特性进行研究。1试验材料1.1菌种来源及药品菌种取自某印染厂废水处理站曝气池内污泥。活性蓝染料(以下均称染料),牛肉膏(生化试剂),蛋白胨(生物试剂),琼脂(生化试剂),氯化钠(分析纯),葡萄糖(分析纯),淀粉(分析纯),氢氧化钠(分析纯),K2HPO?43H2O(分析纯),Na2HPO?412H2O(分析纯),CaCl?22H2O(分析纯)。1.2试验仪器78-1型磁力加热搅拌器(青岛乐清乐成电器厂),UV-2401PC紫外分光光度计(日本岛津),高速离心机LG10-2.4A(北京医用离心机厂),压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂),酸度计PHS-3C(天津市盛邦电器厂),SPX-150B-Z振荡培养箱(上海跃进医疗器械厂)。2实验步骤与方法2.1污泥的驯化取印染厂污水处理站的曝气池混合液,加入适量活性蓝染料驯化,调节溶液pH值为7.0～8.0,采用生活污水做补充碳源,常温下驯化培养,并注意观察溶液颜色的变化。通过对污泥的驯化培养,使污泥中以染料为营养源的细菌大量繁殖,那些对染料不适应的微生物被淘汰。在驯化培养4d后,溶

液中染料的颜色明显降低,这说明在所制备的活性污泥的驯化液中存在可以降解染料的菌株。2.2脱色菌的纯种分离以及富集培养首先,制备选择性培养基,配方见表1。

将混合均匀的活性污泥制备成浓度为10-1～10-6的菌液。然后取10套无菌培养皿编号,10-4～10-6各3个,另一个为空白对照。取1支1mL无菌移液管从浓度最小的10-6菌液开始,按浓度从小到大的顺序分别吸取0.5mL菌液于相应编号的培养皿内。再将已经冷却至45℃左右的培养基倾倒入相应的培养皿中,转动培养皿,使培养基和菌液充分混合,冷凝成平板后,倒置于30℃的生化培养箱中培养2d。两天后可观察到培养皿表面有若干菌落形成,然后将比较清晰的菌落在选择性培养基(表1)上进行平板划线[5],经过多次反复划平板后得到单菌株,并对菌株进行编号,记录菌落形态(表2)。然后将得到的菌株接种[6]到液体富集培养基(表1)中,在一定温度下富集培养,用以进行各种条件下的脱色性能试验研究。2.3优势脱色菌的筛选用紫外分光光度计对活性蓝染料的波长进行扫描,得到该染料的最大吸收波长,在最大吸收波长处测得染料溶液的最大吸光度Abs值。配制染料浓度为20mg/L-1的液体染料培养基,将5株菌分别接种到液体染料培养基中,接种量为10mL,作脱色观察。每0.5d取该菌培养液高速离心分离,取上层清液,测最大吸收波长处的吸光度Abs值,以未接种菌体的培养液做空白,计算该菌的脱色率。以脱色率表示该菌的脱色能力:脱色率=(A-B)/A×100%式中,A表示不接种菌液的最大吸光光度,B表示接种过菌液的最大吸光光度。降解3d后,各菌株的脱色性能试验结果见图1。